1906年，鲁迅回到东京，从事文学活动与翻译，介绍了俄国、东欧和其他一些被压迫民族的文学作品，与周作人合作翻译出版了《域外小说集》，写了《人的历史》、《科学史教篇》、《文化偏至论》、《摩罗诗力说》等论文。1909年离日回国，先後在杭州、绍兴任教。
辛亥革命爆发後，积极参加宣传活动。1918年在《新青年》上发表第一篇划时代的白话小说《狂人日记》，成为五四思想革命和文化革命的第一声。接着发表包括《阿Q正传》的14篇小说，1923年《呐喊》出版，为中国现代文学和革命现实主义奠了基。同时，创作大量杂文、进行文化的批判，解剖「国民性」弱点，形成「鲁迅杂文」一独立文体。
1920至1926年在北京大学、北京女子师范大学任教，研究及讲授中国小说史，并把讲义整理成《中国小说史略》出版。1924年发表《祝福》、《伤逝》等11个短篇小说，结集为《彷徨》出版。并发表散文诗集《野草》。1925年前後，参加了语丝社和未名社，出版《语丝》、《莽原》、《未名》刊物，积极指导青年，并与当时的复古派诸如「学衡」派、「甲寅」派、「现代评论」派进行文学、思想，甚至是政治领域上的论辩与对抗。
1927年10月，鲁迅离开广州赴上海，开始主编《语丝》半月刊，与郁达夫合编《奔流》月刊，并编辑《科学的艺术论》丛书，研究马克思主义、出版《朝花周刊》，与创造社、太阳社就革命文学问题展开论争。
1930年左翼作家联盟成立，鲁迅是筹备人与领导人之一。主要是以杂文为主参加各种政治与文艺的论战，但鲁迅与左联领导有很多思想上的冲突，因而有人认为他是自由作家。1927年到1936年间，鲁迅创作了很多回忆性的散文与大量思想性的杂文，翻译、介绍外国的进步文学作品。1936年10月19日，鲁迅在上海因肺结核病去世，得年55岁。葬於上海虹桥万国公墓。